中间偃麦草2Ai-2染色体DNA文库构建及特异性序列的克隆

• 作者: 何聪芬 徐琼芳 李连城 辛志勇 马有志
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 中间偃麦草 染色体微分离及微克隆 LA-PCR RFLP 特异性DNA序列
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 作物遗传育种·种质资源
• 页码范围: 163-169
• 页数: 7页
• 分类号: S512.1
• 字数: 5522字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2004.02.002

摘要

以二体异附加系Z2与其普通小麦亲本宛7107杂交F,的花粉母细胞为材料,用原位杂交方法确定其中的单价体为中间偃麦草2Ai-2染色体;在此基础上,以显微分离、回收、LA-PCR(Linker-adaptor PCR)扩增了该条染色体,扩增产物长度在0.15～3kb之间,主要分布在0.2～2kb.以α-3 2P-dCTP标记的中间偃麦草的基因组DNA为探针,对LA-PCR扩增产物进行杂交,证实扩增产物来自中间偃麦草.将扩增片段纯化后连接到质粒载体pUCl 8上,构建了2Ai-2染色体DNA文库.该文库包含约5 × 105个克隆.随机选取500个克隆进行分析,发现插入片段长200-1500 bp,平均580 bp.点杂交结果表明,56%为低/单拷贝序列,44%为重复序列.从文库筛选到4个中间偃麦草克隆.RFLP结果表明,3个为多态性低拷贝(Mag065、Mag088、Mag139),1个为高度重复序列克隆(Mag104).GISH结果表明,Mag104为中间偃麦草染色体专化重复序列.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李连城		12	206	7.0	12.0