TLR4全长及其截断体重组腺病毒对Rf-6A细胞骨架的影响

• 作者: 姜勇 孙学刚 宋革
• 来源期刊: 生物物理学报
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒 细胞骨架 toll样受体4 脂多糖
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 细胞骨架
• 页码范围: 119-124
• 页数: 6页
• 分类号: Q78|R363
• 字数: 4080字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-6737.2004.02.006

摘要

为了研究LPS受体TLR4全长及其胞内段缺失的TLR4截断体(△TLR4)的绿色荧光蛋白重组腺病毒对内皮细胞系Rf-6A骨架蛋白的影响,采用PCR方法扩增目的基因片段,亚克隆至腺病毒穿梭质粒pAdTrack中,用BJ5183细菌同源重组法将目的基因重组于腺病毒骨架载体,重组腺病毒质粒经Pac I酶切线性化后,用脂质体法转染293细胞进行腺病毒的包装扩增,用重组腺病毒感染Rf-6A细胞,采用免疫荧光标记方法观察结果.免疫荧光标记结果表明Ad-△TLR4明显抑制了LPS引起的细胞骨架F-actin的解聚与重排,Ad-TLR4则使LPS引起的F-actin应力纤维产生增强.以上结果说明TLR4全长及其截断体的重组腺病毒感染内皮细胞对LPS诱导的细胞骨架变化具有不同的影响,Ad-△TLR4对LPS引起的内皮细胞骨架变化具有抑制作用.