碱性土壤基因组DNA的分离纯化和基因文库的构建

• 作者: 孙栋 梁璇 武波 蒋承建 隆文杰
• 来源期刊: 广西农业生物科学
• 学科: 生物学
• 关键词: 混合基因组DNA DNA部分文库 克隆
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 生物技术专栏
• 页码范围: 63-66
• 页数: 4页
• 分类号: Q781
• 字数: 3101字
• 语种: 中文

摘要

直接从广西南宁市凤凰纸业排污沟碱性土壤样品中抽提和分离纯化混合基因组DNA,所获得DNA的产量为每克土壤样品10～30 μg.采用限制性内切酶EcoR1酶处理后,构建了以pGEM-3Zf(+)为载体的DNA部分文库.文库的容量为23 650个转化子, 外源片段DNA平均大小为3.2 kb.建库效率为每克环境样品获得6 000个左右的含1～15 kb外源随机插入片段的克隆.通过DNA序列测定和同源性比较,对从文库随机调取的16个转化子序列进行分析,发现13个外源插入片段包含序列尚未确定的DNA片段.