构建链霉菌小型基因文库的新型正选择克隆载体

• 作者: 尚广东 朱宇鹏 马超
• 来源期刊: 中国抗生素杂志
• 关键词: 正选择克隆载体 链霉菌 小型基因文库 rpsL基因 链霉素
• 年，卷（期）: 2010,（11）
• 页码范围: 835-839
• 分类号: Q78
• 语种: 中文

摘要

目的 构建链霉菌小型基因文库是获得链霉菌基因的一个重要手段,常规使用的克隆载体常有着一定程度的假阳性,因此构建的高效率的克隆载体有着实际的意义.方法 本研究通过重叠延伸PCR手段将一个96bp的多克隆位点序列插入至rpsL基因的启动子和开放阅读框之间,将此DNA片段克隆至pBluescript KS(-)而获得了新型的正选择克隆载体pLS975.结果 pLS975有18个酶切位点可用于外源DNA片段的克隆,重组克隆以氨苄青霉素抗性和链霉素抗性进行筛选,宿主菌为链霉素抗性菌株如Escherichia coli DH10B.两个小型基因文库的制备显示pLS975具有很高的克隆效率(96%～100%).结论 pLS975可成为构建链霉菌小型基因文库的良好载体.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	尚广东		5	4	1.0	1.0
2	马超		1	0	0.0	0.0
3	朱宇鹏		1	0	0.0	0.0