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摘要:
Programmed death-1 (PD-1) is a costimulatory molecule of CD28 family expressed onactivated T, B and myeloid cells. The engagement of PD-1 with its two ligands, PD-L1 and PD-L2, inhibitsproliferation of T cell and production of a series of its cytokines. The blockade of PD-1 pathway is involvedin antiviral and antitumoral immunity. In this study, human PD-1 cDNA encoding extracellular domain wasamplified and cloned into expression plasmid pGEX-5x-3. The fusion protein GST-PD-1 was effectivelyexpressed in E. coli BL21 (DE3) as inclusion bodies and a denaturation and refolding procedure was performed to obtain bioactive soluble GST-PD-1. Fusion protein of above 95% purity was acquired by a convenient two-step purification using GST affinity and size exclusion columns. Furthermore, a PD-L1-dependentin vitro bioassay method was set up to characterize GST-PD-1 bioactivity. The results suggested that GSTPD-1 could competently block the interaction between PD-L1 and PD-1 and increase the production of IL2 and IFN-γ of phytohemagglutinin-activated T cells.
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文献信息
篇名 Refolding and Characterization of Recombinant Human GST-PD-1 Fusion Protein Expressed in Escherichia coli
来源期刊 生物化学与生物物理学报(英文版) 学科
关键词 costimulatory molecule GST-PD-1 refolding
年,卷(期) 2004,(2) 所属期刊栏目
研究方向 页码范围 141-146
页数 6页 分类号
字数 语种 英文
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costimulatory molecule
GST-PD-1
refolding
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期刊影响力
生物化学与生物物理学报(英文版)
月刊
1672-9145
31-1940/Q
16开
上海市岳阳路319号31-B
4-210
1961
eng
出版文献量(篇)
3098
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