CD4拮抗类肽分子和非肽类小分子化合物筛选的细胞模型的建立

• 作者: 李松 沈倍奋 肖鹤 黎燕
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 融合表达 细胞黏附 玫瑰花环 竞争抑制
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 基础免疫学
• 页码范围: 765-768
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3400字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.10.002

摘要

目的建立基于CD4分子和MHC Ⅱ类分子相互作用的细胞黏附模型. 方法 RT-PCR扩增人源性CD4胞浆缺陷型基因,克隆入绿色荧光表达载体pEGFP-N1中.将pEGFP-N1/CD4转染HEK293细胞,G418筛选稳定克隆.利用Western blot方法及激光共聚焦显微技术检测和观察细胞中CD4分子的表达及定位. 结果 RT-PCR、Western blot法分别从mRNA及蛋白水平检测到细胞中CD4分子的整合及表达;激光共聚焦显微镜观察到CD4分子于细胞核外周尤其是胞膜分布.HEK293/CD4稳定细胞克隆与Raji细胞孵育1*!h后,可见玫瑰花环的形成(rosette formation),而CD4抗体能够明显抑制这种玫瑰花环的形成. 结论 HEK293/CD4-Raji细胞黏附模型的建立,为CD4拮抗类肽分子和非肽类小分子化合物的筛选提供了一个可应用的技术平台.