人胰岛素原基因的包装及增殖

• 作者: 刘兆喆 吴志香 杜宁 袁凤山
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 人胰岛素原基因 逆转录病毒载体 包装细胞 病毒滴度
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 临床医学
• 页码范围: 144-146
• 页数: 3页
• 分类号: R587.1
• 字数: 2181字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.0258-4646.2004.02.020

摘要

目的:用PA317包装细胞包装突变人胰岛素基因原质粒,并检测其增殖情况.方法:用脂质体转染法将PLXSN-MPINS质粒转染至PA317包装细胞,用G418筛选出阳性PA317包装细胞克隆并测定胰岛素原基因浓度,用TRIZOL法提取未转染和转染后PA317细胞的基因组DNA,PCR检测突变人胰岛素基因的整合情况.结果:(1)用脂质体转染法获得G418阳性PA317包装细胞克隆;(2)该细胞克隆获高滴度的胰岛素原基因浓度;(3)PCR方法在转染后PA317基因组中检测到突变人胰岛素原基因.结论:脂质体转染法是一种操作简便且行之有效的转染方法.PA317包装细胞系可成功包装突变人胰岛素原基因质粒并可获得高滴度表达,为1型糖尿病基因治疗的进一步实验研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吴志香	辽宁中医学院西医诊断教研室	44	103	7.0	8.0
2	袁凤山	中国医科大学附属第一医院内分泌科	31	129	7.0	9.0
3	杜宁	中国医科大学附属第一医院内分泌科	5	18	2.0	4.0
4	刘兆喆	中国医科大学附属第一医院内分泌科	1	11	1.0	1.0