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PD-L2剪切异构体与EGFP融合蛋白的表达及其亚细胞定位研究
PD-L2剪切异构体与EGFP融合蛋白的表达及其亚细胞定位研究
作者:
何贤辉
刘毅
徐丽慧
曾耀英
蔡小嫦
基本信息来源于合作网站,原文需代理用户跳转至来源网站获取
PD-L2
剪切异构体
绿色荧光蛋白
融合蛋白
K562细胞
摘要:
目的探讨PD-L2的剪切异构体在哺乳动物细胞的表达和亚细胞定位. 方法以RT-PCR方法克隆人PD-L2基因的常规剪切体和新型剪切异构体的cDNA,构建其与EGFP融合的表达载体,分别转染K562细胞进行表达,经抗PD-L2抗体染色后以流式细胞仪和激光共聚焦显微镜分析融合蛋白的表达及其亚细胞定位. 结果从活化的人白细胞中克隆到常规剪切体PD-L2Ⅰ和新型剪切异构体PD-L2Ⅱ的cDNA, 后者删除了编码胞外区Ig-C结构域的外显子3.进而构建了PD-L2Ⅰ-EGFP和PD-L2Ⅱ-EGFP融合蛋白表达载体,分别转染K562细胞.流式细胞仪分析显示,转染前者的细胞中既可检测到EGFP的表达又可在细胞膜上检测到PD-L2表达;而转染后者的细胞中只能检测到EGFP的表达,在其细胞膜上不能检测到PD-L2表达.共聚焦显微镜观察显示,PD-L2Ⅰ-EGFP主要分布于细胞膜表面,PD-L2Ⅱ-EGFP则主要分布于细胞内. 结论常规剪切体PD-L2Ⅰ能正确定位于细胞膜表面,而新型剪切异构体PD-L2Ⅱ则位于细胞内,不能运输至细胞膜,提示不同PD-L2剪切异构体可能与其功能的调变有关.
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内容分析
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文献信息
篇名
PD-L2剪切异构体与EGFP融合蛋白的表达及其亚细胞定位研究
来源期刊
中华微生物学和免疫学杂志
学科
医学
关键词
PD-L2
剪切异构体
绿色荧光蛋白
融合蛋白
K562细胞
年,卷(期)
2004,(11)
所属期刊栏目
基础免疫学
研究方向
页码范围
878-882
页数
5页
分类号
R3
字数
5192字
语种
中文
DOI
10.3760/j:issn:0254-5101.2004.11.012
五维指标
作者信息
序号
姓名
单位
发文数
被引次数
H指数
G指数
1
刘毅
郑州大学第一附属医院皮肤科
17
129
6.0
11.0
传播情况
被引次数趋势
(/次)
(/年)
引文网络
引文网络
二级参考文献
(0)
共引文献
(0)
参考文献
(10)
节点文献
引证文献
(1)
同被引文献
(1)
二级引证文献
(1)
1999(1)
参考文献(1)
二级参考文献(0)
2001(5)
参考文献(5)
二级参考文献(0)
2003(4)
参考文献(4)
二级参考文献(0)
2004(0)
参考文献(0)
二级参考文献(0)
引证文献(0)
二级引证文献(0)
2013(1)
引证文献(1)
二级引证文献(0)
2014(1)
引证文献(0)
二级引证文献(1)
研究主题发展历程
节点文献
PD-L2
剪切异构体
绿色荧光蛋白
融合蛋白
K562细胞
研究起点
研究来源
研究分支
研究去脉
引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
中华微生物学和免疫学杂志
主办单位:
中华医学会
出版周期:
月刊
ISSN:
0254-5101
CN:
11-2309/R
开本:
大16开
出版地:
北京市经济技术开发区经海二路38号
邮发代号:
2-55
创刊时间:
1981
语种:
chi
出版文献量(篇)
5865
总下载数(次)
10
总被引数(次)
26456
相关基金
国家自然科学基金
英文译名:
the National Natural Science Foundation of China
官方网址:
http://www.nsfc.gov.cn/
项目类型:
青年科学基金项目(面上项目)
学科类型:
数理科学
国家重点基础研究发展计划(973计划)
英文译名:
National Basic Research Program of China
官方网址:
http://www.973.gov.cn/
项目类型:
学科类型:
农业
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