ZNF580-EGFP融合蛋白的亚细胞定位研究

• 作者: SUN Hui-yan 孟祥艳 张文成
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: ZNF580-EGFP融合蛋白 真核表达载体 绿色荧光蛋白 亚细胞定位
• 年，卷（期）: 2008,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1590-1594
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 4086字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2008.08.029

摘要

目的:构建增强型绿色荧光报告蛋白(EGFP)与人ZNF580融合蛋白的真核表达载体,转染MGC803细胞进行表达,研究ZNF580-EGFP融合蛋白在MGC803细胞的亚细胞定位.方法:利用PCR技术扩增ZNF580基因cDNA开放阅读框架全编码区、N端编码区、C端编码区,分别克隆到真核表达载体pEGFP-C1,BglⅡ及HindⅢ双酶切电泳筛选、鉴定并测序.荧光显微镜下观察ZNF580-EGFP在MGC803细胞中的表达及亚细胞定位.结果:酶切pEGFP-ZNF580(1-172)、pEGFP-ZNF580(1-93)、pEGFP-ZNF580(94-172),电泳分析插入片段长度分别为:526 bp、289 bp、247 bp,经连接点两端进行测序证实连接正确.pEGFP-ZNF580(1-172)、pEGFP-ZNF580(94-172)表达的ZNF580-EGFP融合蛋白定位在MGC803细胞核.结论:成功构建真核表达载体并在MGC803细胞中得到表达,分析其核定位信号可能位于ZNF580蛋白的C端C2H2型锌指主构域94-172位氨基酸区间.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张文成	武警医学院病理生理学教研室	36	174	6.0	11.0
2	孟祥艳	武警医学院病理生理学教研室	18	64	5.0	6.0
3	SUN Hui-yan	武警医学院病理生理学教研室	1	12	1.0	1.0