穿膜肽-EGFP融合蛋白的表达、纯化与鉴定

• 作者: 万彦彬 冷静 周洁 郭晓云
• 来源期刊: 基础医学与临床
• 学科: 医学
• 关键词: 穿膜肽 增强型绿色荧光蛋白 膀胱肿瘤
• 年，卷（期）: 2010,（9）
• 页码范围: 902-906
• 分类号: R392
• 字数: 3141字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建EGFP-CPPs融合基因载体,表达、纯化并鉴定EGFP-CPPs融合蛋白.方法 通过碱基合成的方法合成含有CPPs基因序列的EGFP上游引物,PCR扩增后收集CPPs-EGFP融合基因片段并电泳鉴定,将融合基因表达载体转染大肠杆菌并扩增表达,收集表达蛋白后过层析柱纯化,蛋白电泳检测表达蛋白分子质量,蛋白飞行质谱分析检测蛋白序列,体外细胞实验验证其穿膜功能.结果 电泳检测可见与CPPs-EGFP分子质量对应的电泳条带,构建质粒测序含有目的 基因序列.蛋白电泳检测到纯度较高的融合蛋白,其蛋白序列与目的 序列一致.体外细胞实验证实了融合蛋白的穿膜功能.结论 成功制备了具有穿膜功能的CPPsz-EGFP融合蛋白,为其促进抗体-蛋白微球偶联物进入肿瘤细胞发挥治疗作用的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	周洁	广西医科大学第一附属医院泌尿外科	24	96	6.0	7.0
2	冷静	广西医科大学第一附属医院免疫学教研室	36	150	6.0	10.0
3	郭晓云	广西医科大学第一附属医院消化内科	19	72	5.0	7.0
4	万彦彬	广西医科大学第一附属医院免疫学教研室	2	6	1.0	2.0