pET15b-YARA-EGFP原核表达质粒的构建及融合蛋白YARA-EGFP的表达与纯化

• 作者: 王家宁 郑飞 郭凌郧 陈思思 黄永章
• 来源期刊: 郧阳医学院学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 细胞穿透肽 增强型绿色荧光蛋白 原核表达 融合蛋白
• 年，卷（期）: 2009,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 116-119,124,封2
• 页数: 6页
• 分类号: Q753
• 字数: 4058字
• 语种: 中文

摘要

目的:构建原核表达载体 pET15b-YARA-EGFP,并进行YARA-EGFP融合蛋白的表达和纯化.方法:用分子克隆技术构建出表达型载体 pET15b-YARA-EGFP,在E.coli BL21(DE3)中表达融合蛋白YARA-EGFP,并进行Ni2+-NTA树脂柱亲和层析以纯化蛋白.结果:经测序证实成功构建了表达型载体pET15b-YARA-EGFP,YARA-EGFP融合蛋白在E.coli BL21(DE3)中得到表达,纯化后的蛋白浓度为1.098 mg/mL.SDS-PAGE和Western blot分析表明纯化蛋白为目的蛋白YARA-EGFP.结论:已成功制备出YARA-EGFP融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭凌郧	郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所	26	189	9.0	12.0
2	王家宁	郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所	119	709	13.0	20.0
3	黄永章	郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所	66	379	11.0	16.0
4	郑飞	郧阳医学院附属人民医院临床医学研究所	9	73	5.0	8.0
5	陈思思	武汉大学人民医院心内科	11	19	2.0	3.0