用积分法测定血清芳香酯酶活性

• 作者: 余婷婷 宋正 左渝萍 康格非 廖飞 曾昭淳 杨柳 王咏梅 王娜 王继红 袁小媚
• 来源期刊: 第三军医大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 血清酶活性 积分法 反应曲线 非线性最小二乘拟合 芳香酯酶
• 年，卷（期）: 2004,（10）
• 所属期刊栏目: 技术方法
• 页码范围: 923-925
• 页数: 3页
• 分类号: Q556.1|R446.1
• 字数: 4203字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-5404.2004.10.025

摘要

目的以血清芳香酯酶(ArE)为模型,用模拟和实验考察积分法测定酶活性的可靠性.方法用酚乙酸酯测定ArE反应曲线.按ArE的积分速度方程In(S0/Si)+(S0-Si)/Km=(Vm/Km)×ti计算无误差反应曲线,叠加随机误差得模拟曲线.以底物浓度(S0)为参数用Equ①非线性拟合测定Vm/Km,换算得Vm.结果模拟表明积分法测定酶活性与S0无关,升高S0可提高测定上限.实验表明S0低于Km的20%时Vm/Km无变化;重复性5.8%(ν= 6);本底和反应起点延迟无干扰;升高S0可提高上限.此积分法用20% Km的S0测定86份血清,ArE活性Vm呈正态分布,与据初速度按米氏方程计算的Vm无差异.结论此积分法能可靠测定酶活性Vm/Km或Vm.