血管内皮生长因子体外诱导CD34+造血干/祖细胞信号传导与转录活化因子的活化

• 作者: 叶大风 叶枫 吕卫国 谢幸 陈怀增
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: CD34+造血干/祖细胞 血管内皮生长因子 血管内皮生长因子受体 信号传导与转录活化因子
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 12-17
• 页数: 7页
• 分类号: R392|R331
• 语种: 中文

摘要

目的通过对血管内皮生长因子(VEGF)诱导CD34+造血干/祖细胞内信号传导与转录活化因子(STAT)活化的研究,探索VEGF作用于CD34+造血干/祖细胞的分子机制及其信号传导途径.方法利用磁活化细胞分选系统(MACS)分离并纯化脐血CD34+造血干/祖细胞,体外以重组人细胞因子VEGF(50 ng/ml)持续刺激不同时间(0,15,30,45,60,90min)后,提取细胞总蛋白,用Western blot检测CD34+造血干/祖细胞内STAT-3和STAT-5磷酸化;免疫细胞化学鉴定CD34+造血干/祖细胞表面VEGF受体-2(VEGFR2)的表达,以及VEGF刺激不同时间后CD34+造血干/祖细胞内磷酸化STAT-3和STAT-5有无发生转核;采用能与VEGFR2特异性结合的七肽ATWLPPR封闭VEGF与VEGFR2的结合,Western blot观察STAT-3和STAT-5的磷酸化是否被相应阻断.结果Western blot检测结果显示,CD34+细胞在VEGF刺激下,STAT-3和STAT-5均发生了磷酸化,50 ng/ml VEGF作用15 min后,即可检测到磷酸化的STAT-3和STAT-5的表达,并分别在30和45 min时达到峰值;之后开始下降,到90 min时均已检测不到,不同刺激时间组间有显著性差异(P=0.0001).免疫细胞化学显示VEGF能诱导磷酸化STAT-3发生转核并且在作用30 min时最为显著,不同刺激时间组间有显著性差异(P=0.0001),而磷酸化STAT-5在VEGF刺激的各时间组均未出现明显的转核现象(P＞0.05).CD34+造血干/祖细胞表面有VEGF膜受体VEGFR2的表达,当ATWLPPR(80 μmol/L)特异性封闭VEGF与VEGFR2的结合后,STAT-3和STAT-5的磷酸化被完全阻断.结论STAT信号传导通路通过VEGFR2特异性的介导参与了VEGF在CD34+造血干/祖细胞内的信号传导.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕卫国	浙江大学医学院附属妇产科医院肿瘤科	139	1278	17.0	30.0
2	谢幸	浙江大学医学院附属妇产科医院肿瘤科	199	1588	20.0	32.0
3	叶大风	浙江大学医学院附属妇产科医院肿瘤科	50	529	9.0	21.0
4	叶枫	浙江大学医学院附属妇产科医院肿瘤科	33	235	7.0	14.0
5	陈怀增	浙江大学医学院附属妇产科医院肿瘤科	39	435	8.0	19.0