生存素(Survivin)的克隆表达及生物医学意义初步探讨

• 作者: 侯毅鞠 张利朝 张惠中 张盈华 邹爱民
• 来源期刊: 西南国防医药
• 学科: 医学
• 关键词: 凋亡抑制因子 基因克隆 原核表达
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 355-358
• 页数: 4页
• 分类号: R393.1
• 字数: 2380字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1004-0188.2004.04.004

摘要

目的:克隆、表达肿瘤特异性凋亡抑制因子(生存素,Survivin),并对其生物学意义进行研究.方法:从人白血病细胞系HL60提取总RNA,用RT-PCR方法扩增出SVV基因片段.将SVV基因片段插入载体pGEM-T Easy中,经全自动序列分析仪测序正确后用NdeⅠ/XhoⅠ双酶切,亚克隆到原核表达载体pRSET-C中,构建重组表达载体pRSET-c-SVV,并转化大肠杆菌BL21菌株.取工程菌,经IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE鉴定并初步纯化.结果:经RT-PCR测序和酶切鉴定,成功地克隆了人SVV基因;经IPTG诱导的重组质粒pRSET-c-SVV表达出相对分子质量约为16500U的蛋白,与预期的结果相符.结论:成功克隆了人肿瘤细胞的抗凋亡基因SVV,并在大肠杆菌BL21中表达出SVV蛋白.该基因的高效表达为进一步探讨以SVV为基础的肿瘤诊、治奠定了实验基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张盈华	第四军医大学唐都医院中心实验室	39	276	10.0	14.0
2	张利朝	第四军医大学唐都医院中心实验室	23	172	7.0	12.0
3	张惠中	第四军医大学唐都医院中心实验室	196	724	13.0	17.0
4	侯毅鞠	第四军医大学唐都医院中心实验室	5	19	2.0	4.0
5	邹爱民	第四军医大学唐都医院中心实验室	13	68	6.0	8.0