甲状腺癌特异性低表达基因的筛选与克隆

• 作者: 廖二元 文格波
• 来源期刊: 南华大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 甲状腺癌 抑制性消减杂交技术 cDNA末端快速扩增 基因
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 基础论著
• 页码范围: 4-7,25
• 页数: 5页
• 分类号: R736
• 字数: 3591字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.2095-1116.2004.01.002

摘要

目的筛选并克隆在甲状腺癌组织中特异性低表达的基因.方法 (1)应用抑制性消减杂交(SSH)进行基因差异表达分析,构建人甲状腺癌组织与正常甲状腺组织之间差异表达的cDNA消减文库.(2)克隆、鉴定甲状腺癌组织特异性低表达的基因.(3)登录Genbank,运用Blastn程序进行同源性分析.(4)应用cDNA末端快速扩增法(RACE)获取目的基因TCRS30的cDNA全长.(5)Northern blot验证TCRS30号基因的差异表达.结果构建了高消减效率的人甲状腺癌cDNA消减文库,通过筛选阳性克隆,获得一个在甲状腺癌组织中低表达的基因片段,经检索Genbank表明,在已知的人类EST数据库中找不到高度同源的序列,提示它可能来自于在甲状腺癌中特异性低表达的新基因.以RACE法获知TCRS30的cDNA全长约为4.5 kb,通过Northern blot初步验证了TCRS30号基因在甲状腺癌和正常甲状腺组织中存在差异表达.结论通过SSH和RACE技术,获得了一个在甲状腺癌和正常甲状腺组织中差异表达的未知基因片段TCRS30,它可能代表着一条对甲状腺癌有抑制作用的新基因.