库尔勒香梨的苹果茎痘病毒cDNA探针检测技术研究

• 作者: 吴忠华 朱军 牛建新 王小兵 覃伟铭 马兵钢
• 来源期刊: 中国农业科学
• 学科: 农学
• 关键词: 库尔勒香梨 苹果茎痘病毒 cDNA探针
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 园艺·贮藏·保鲜·加工
• 页码范围: 99-105
• 页数: 7页
• 分类号: S661
• 字数: 7201字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0578-1752.2004.01.016

摘要

以库尔勒香梨叶片和皮层为材料,对2种总RNA提取方法进行了比较研究,从中行筛选出了适合库尔勒香梨的提取方法;并利用RT-PCR反应体系成功合成了生物素标记的cDNA探针,在此基础上,对影响杂交灵敏度的主要因素进行了试验研究,结果表明,当探针浓度为400 ng·ml-1,甲酰胺浓度为45%,42℃杂交反应6 h,可获得最高灵敏度.进口硝酸纤维素膜的灵敏度最好,基本无背景.Tween20的封闭效果比牛血清白蛋白好.对不同组织和不同提取方法提取的总RNA进行了杂交检测,结果表明,不论幼叶、老叶、皮层及冷冻叶片均可出现杂交信号,2种提取方法提取的总RNA也都出现了杂交信号.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王小兵	石河子大学农学院	3	30	2.0	3.0
2	覃伟铭	石河子大学农学院	2	29	2.0	2.0
3	朱军	石河子大学农学院	2	17	2.0	2.0
4	吴忠华	石河子大学农学院	1	12	1.0	1.0