p53、CDK4基因引物扩增的cDNA-Biotin探针与4株克隆瘤细胞原位杂交

• 作者: 吕占军 徐增年 牛彦平 王秀芳
• 来源期刊: 河北医科大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 克隆细胞 分子探针 原位杂交
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 65-67
• 页数: 4页
• 分类号: Q344.13
• 字数: 2543字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-3205.2004.02.001

摘要

目的用p53、CDK4基因引物扩增的生物素标记的互补DNA(cDNA-Biotin) 探针,检测S2D9、H2D8、E2G8及L3E11克隆瘤细胞株中p53、CDK4相关基因表达的差异.方法提取S2D9、H2D8、E2G8及L3E11克隆细胞总RNA,分别用p53、CDK4基因引物经反转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction, RT-PCR)扩增.扩增产物用6%聚丙烯酰胺凝胶电泳,经银染显色后,切下4个克隆细胞间有差异的条带,回收DNA再次扩增,扩增产物经纯化后用生物素标记,制成生物素标记的cDNA探针,再与4株克隆瘤细胞涂片,做探针原位杂交.结果 4个克隆瘤细胞株的RNA与2种引物RT-PCR后,获得22条可以进行克隆的cDNA,取其中11条经生物素标记成cDNA探针.这些探针多数与不同瘤细胞株杂交显示较明显差异. 结论这些自制的cDNA-Biotin探针可以作为质控克隆瘤细胞株的试剂.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	吕占军	河北医科大学实验动物学部	60	548	13.0	21.0
2	牛彦平	河北医科大学第二医院康复科	24	153	7.0	11.0
3	徐增年	河北医科大学实验动物学部	21	117	7.0	9.0
4	王秀芳	河北医科大学实验动物学部	39	110	7.0	8.0