两种不同的转基因细胞构建体系的比较

• 作者: 孙建军 张学光 施勤 王勤 葛彦 陈永井
• 来源期刊: 中国免疫学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 真核表达 转基因细胞 表达效率
• 年，卷（期）: 2004,（1）
• 所属期刊栏目: 分子与细胞免疫学
• 页码范围: 46-49
• 页数: 4页
• 分类号: R392
• 字数: 3390字
• 语种: 中文

摘要

目的:比较目的基因在两种不同表达体系构建的转基因细胞上的表达,选择更好的构建体系.方法:脂质体法将重组真核细胞表达载体pcDNA3/PD-L1导入L929细胞,G418(600 μg/ml)筛选抗性细胞株,同时将重组逆转录病毒载体pGEZ-Term/PD-L1与辅助载体共转染293T细胞,包装病毒颗粒,其上清感染L929细胞后,经Zeocin(500 μg/ml) 筛选抗性细胞.流式细胞仪(FCM)检测目的蛋白在两种细胞膜上的表达.结果:两种体系对目的基因的瞬时表达无明显差别;用pcDNA3构建的转基因细胞膜上目的分子表达稳定性差,表达率低,而用pGEZ-Term构建的则目的蛋白稳定高表达,表达率近100%.结论:两种构建体系均能瞬时表达目的分子,pGEZ-Term表达体系更适于构建长期稳定表达目的基因的转基因细胞.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张学光	苏州大学医学生物技术研究所	399	1957	18.0	24.0
2	施勤	苏州大学医学生物技术研究所	55	280	9.0	13.0
3	陈永井	苏州大学医学生物技术研究所	78	388	11.0	14.0
4	王勤	苏州大学医学生物技术研究所	31	140	7.0	10.0
5	孙建军	苏州大学医学生物技术研究所	8	90	5.0	8.0
6	葛彦	苏州大学医学生物技术研究所	21	100	6.0	9.0