一种高效表达多肽或小分子蛋白平台的构建

• 作者: Ding Jeak Ling 李长贵
• 来源期刊: 中华微生物学和免疫学杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: S3 多联体 基因表达 体外切割
• 年，卷（期）: 2004,（2）
• 所属期刊栏目: 基因工程技术
• 页码范围: 146-149
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 字数: 3583字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/j:issn:0254-5101.2004.02.025

摘要

目的克服小分子蛋白或多肽在大肠杆菌表达系统中易降解、表达量低的问题,为基因工程生产此类产品提供一种简便有效的解决方案. 方法以33个氨基酸的小分子蛋白(factor C的S3功能区)为例,用PCR方法扩增了基因,并克隆到载体pBBS.利用载体带有的BbsⅠ酶切位点特性和添加到引物上的特殊序列,使插入片段在体外定向连接成多联体,然后重新连接到pBBS. 结果成功构建了S3的二联体、四联体及八联体克隆.转移至表达载体pET22b后,在BL21细菌宿主中诱导表达.S3单体表达不明显,而四联体(rS3-4mer)表达量最高.rS3-4mer经纯化后在酸性溶液中水解为rS3单体.以Western blot证明,多联体及其分解单体均可与S3抗血清特异性结合. 结论应用这一系统能有效地构建串联基因,从而提高小分子蛋白或多肽在大肠杆菌中的表达量.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李长贵	中国药品生物制品检定所疫苗三室	35	164	7.0	11.0
2	Ding Jeak Ling	新加坡国立大学生物系	1	5	1.0	1.0