一种新型Cry1Bd蛋白及其原核表达

• 作者: 刘小琼 欧阳春平 郭俊佩 钱红梅 高建华
• 来源期刊: 山西农业科学
• 关键词: 苏云金芽孢杆菌 Cry1Bd蛋白 蛋白表达 可溶性
• 年，卷（期）: 2020,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 683-686,695
• 页数: 5页
• 分类号: S476.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2481.2020.05.07

摘要

Cry1B对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有特异的杀虫活性,但是目前对其研究相对较少.不断发掘新的Cry1B蛋白并研究其杀虫机制能够为农业害虫的生物防治提供依据.前期鉴定出一种新的cry1Bd基因,将其命名为new-cry1Bd.首先,将new-Cry1Bd蛋白与其他Cry1B家族蛋白进行亲缘关系对比,确定其所属分支,然后,把该基因克隆至pHT304载体,由cry1Ac基因启动子和终止子调控其在Bt菌株中的表达;另外,为了研究new-Cry1Bd蛋白N端杀虫活性区域的表达稳定性,把其N端编码序列单独克隆至pHT304中,构建类似的表达框架,用于蛋白表达分析.结果 发现,new-Cry1Bd蛋白与Cry1Bd分支最为接近;序列比对结果显示,new-Cry1Bd蛋白与Cry1Bd1蛋白仅相差3个氨基酸(S572、E1147和L1227),其中,只有第一个差异位点位于N端活性区域,该蛋白及其N端部分(new-Cry1 Bdhalf)均能在Bt菌株中表达,但其表达产物的可溶性差异较大,约有1/2的new-Cry1Bd蛋白表达产物可以溶解于Na2CO3溶液,而大部分new-Cry1Bdhalf蛋白无法溶解.结果 表明,new-Cry1Bd蛋白是一种新型的Cry1Bd蛋白,这是对Cry1B蛋白家族成员的补充;同时,该蛋白的成功表达,可为后期研究其杀虫活性和机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	钱红梅	山西农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
2	郭俊佩	山西农业大学生命科学学院	2	0	0.0	0.0
3	刘小琼	山西农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
4	欧阳春平	山西农业大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0
5	高建华	山西农业大学生命科学学院	11	35	4.0	5.0