Cry1la蛋白的表达与纯化

• 作者: 张义茹 王兴春 郭小琴 郭星 钱红梅 高佳丽 高建华
• 来源期刊: 山西农业科学
• 关键词: 苏云金芽孢杆菌 大肠杆菌 cry1Ia 蛋白表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2019,（5）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 748-750,769
• 页数: 4页
• 分类号: Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2481.2019.05.11

摘要

苏云金芽孢杆菌表达的Cry1Ia蛋白对鳞翅目和鞘翅目昆虫具有较好的杀虫活性.为便于后期评价不同的Cry1Ia蛋白,建立了Cry1Ia蛋白的表达与纯化体系.将一个cry1Ia基因的编码基因接入pET28aDel表达载体,并将其转化大肠杆菌BL21 (DE3)star菌株.在大肠杆菌中诱导Cry1Ia蛋白的表达,并与Bt中的表达产物进行比较.最后,利用Cry1Ia蛋白C端包含的组氨酸标签,对大肠杆菌表达的Cry1Ia蛋白进行纯化.结果 显示,大肠杆菌中Cry1Ia蛋白随着表达时间的延长,产物积累显著,并且其表达量高于Bt菌株,因此,其更适宜生产完整的Cry1Ia蛋白.对大肠杆菌表达的Cry1Ia进行纯化,获得了理想的结果.研究构建了Cry1Ia蛋白的大肠杆菌表达体系,并成功对其进行纯化,可为进一步研究此类蛋白的杀虫活性和机制奠定基础.