人载脂蛋白A1的表达、纯化与羊多抗血清制备

• 作者: 杨欣 赵邑 潘薇薇 梁欣欣 张全爱
• 来源期刊: 生物化工
• 学科: 化学
• 关键词: 载脂蛋白A1 原核表达 离子交换层析 Ni-NTA亲和层析 效价 免疫比浊法
• 年，卷（期）: 2022,（6）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 54-59
• 页数: 5页
• 分类号: S853.4
• 语种: 中文

摘要

目的：载脂蛋白A1（ApoA1）可促进胆固醇的代谢，作为动脉硬化预防因子而受到重视，在临床检测中具有重要意义。目前载脂蛋白A1测定试剂盒在各大医院普遍使用的是进口试剂，检验成本高。本研究旨在为国产载脂蛋白A1检验试剂的研发提供理论基础。方法：将载脂蛋白A1基因克隆至pET-28a载体进行表达，利用离子交换层析与Ni-NTA亲和层析方法纯化目的蛋白，纯化后的载脂蛋白A1免疫山羊，获得羊多抗血清。结果：重组载脂蛋白A1以可溶形式表达，纯度达到95%以上，将纯化后的载脂蛋白A1免疫山羊，间接ELisa免疫效价达到1∶100000以上，经双向扩散法测定效价达到1∶16。结论：本文制备的羊抗血清可用于载脂蛋白A1的检测，可为ApoA1检测试剂盒提供技术参考。