牛冠状病毒S蛋白抗原表位基因的串联表达及抗血清制备

• 作者: 何洪彬 张亮 朱彤 杨宏军 沈付娆 程凯慧 苗自利 解晓莉 邹积振
• 来源期刊: 中国兽医杂志
• 关键词: 牛冠状病毒 抗原表位 串联表达 抗血清
• 年，卷（期）: 2018,（10）
• 所属期刊栏目: 实验观察
• 页码范围: 59-61,66
• 页数: 4页
• 分类号: S852.65+3
• 语种: 中文

摘要

为了构建牛冠状病毒(BCoV)抗原表位基因原核表达载体,并制备多克隆抗体,利用基因合成技术获得BCoV S蛋白两段抗原表位(351 aa ～403 aa、771 aa～784 aa)的基因串联体R,将其重组到pET-28a(+)质粒中,转化至大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,诱导表达抗原表位融合蛋白,用纯化的蛋白免疫新西兰兔制备多克隆抗体.结果显示,成功构建了BCoV抗原表位基因重组表达质粒,获得了融合蛋白的抗血清,Western-Blot检测显示,该抗血清可与BCoV的融合蛋白特异性结合.表明成功构建了BCoV抗原表位基因原核表达载体并获得了BCoV抗血清,本研究为BCoV诊断试剂盒的开发和BCoV多表位疫苗的研究奠定了基础.