SARS冠状病毒M蛋白B细胞抗原表位的原核表达与抗原活性检测

• 作者: 张仁利 张闻 王朝岗 胡章立 邹永东
• 来源期刊: 昆明医学院学报
• 学科: 医学
• 关键词: SARS冠状病毒 M蛋白 抗原表位 原核表达 抗原活性
• 年，卷（期）: 2007,（2）
• 所属期刊栏目: 基础医学
• 页码范围: 17-21
• 页数: 5页
• 分类号: R392.33
• 字数: 3147字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1003-4706.2007.02.004

摘要

目的 从SARS冠状病毒M蛋白的线性重叠肽链文库中筛选出5个B细胞抗原表位,通过构建原核表达载体,表达抗原表位融合蛋白,并检测其抗原活性.方法 应用大肠杆菌高频密码子设计引物,通过PCR方法合成编码SARS冠状病毒M蛋白5个抗原表位(MKY1、MKY2、MKY3、MKY4和MKY5)的DNA片段,经克隆和测序分析,亚克隆至表达载体pET-CKS,转化大肠杆菌BL21;阳性菌株经IPTG诱导,SDS-PAGE分析;大量诱导表达抗原表位融合蛋白,亲和层析予以纯化;Western检测SARS病人阳性血清对融合蛋白的识别.结果 成功构建SARS冠状病毒M蛋白抗原表位的表达载体,在大肠杆菌BL21中表达,融合蛋白表达量达到细菌总蛋白30%,经亲和层析纯化,融合蛋白可被SARS病人抗血清识别.结论 原核表达的抗原表位融合蛋白具有良好的抗原活性,为下一步进行SARS冠状病毒诊断试剂盒的开发研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张仁利		192	798	13.0	17.0
2	胡章立	深圳大学生命科学学院	68	500	13.0	18.0
3	邹永东	深圳大学生命科学学院	11	109	6.0	10.0
4	张闻	昆明医学院细胞生物学及遗传学教研室	14	72	5.0	8.0
5	王朝岗	深圳大学生命科学学院	1	0	0.0	0.0