SARS冠状病毒N蛋白的原核表达及活性测定

• 作者: 戚扬 文翠容 程云 胡谨华 貌盼勇 迟淑萍
• 来源期刊: 解放军医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 严重急性呼吸综合征 N蛋白 基因表达调控,病毒
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 实验研究
• 页码范围: 1019-1021
• 页数: 3页
• 分类号: R3
• 字数: 2841字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0577-7402.2005.11.028

摘要

目的克隆编码严重急性呼吸综合征冠状病毒(SARS-CoV)N蛋白的DNA,构建原核表达质粒pGEX-2T/N,并诱导表达.方法采用RT-PCR方法从病毒培养液中获得N基因片段.将N蛋白基因序列定向插入原核表达载体pGEX-2T中,在大肠杆菌中表达融合蛋白.用表达产物与抗SARS-CoV抗体阳性血清做Western blot.结果获得N基因片段;GST-N融合蛋白以可溶形式表达;Western blot检测表明,其与抗SARS-CoV抗体阳性血清的反应呈阳性.结论成功地构建原核表达质粒pGEX-2T/N,并表达GST-N融合蛋白,为下一步的研究奠定了基础.