SARS冠状病毒S1蛋白的原核表达与鉴定

• 作者: 万艳平 吴移谋 尹卫国 张文波 曾桥 杨秋林 肖建华 谭立志
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SARS冠状病毒 S1蛋白 原核表达 鉴定
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 218-220,224
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1
• 字数: 2563字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2005.03.007

摘要

目的克隆SARS冠状病毒(SARS-CoV)S1基因片段,构建原核表达载体,并在宿主菌中诱导表达带组氨酸标记的融合蛋白.方法人工合成SARS-CoV S1基因片段,克隆至pUCm-T载体,经DNA序列分析和酶切后,将酶切片段亚克隆至原核表达载体pET-28b(+),重组子pET-28b/SARS-S1转化大肠杆菌ril,IPTG诱导表达,Western blot鉴定表达产物;纯化表达产物并用ELISA检测其抗原特异性.结果获得了主要以包涵体形式存在的32kD的目的蛋白,Western blot 鉴定其为带组氨酸标记的融合蛋白,ELISA证明其能与合成肽的抗体及病人血清中的SARS-CoV的抗体特异结合.结论成功构建了SARS-CoV S1基因的组氨酸标记表达载体pET-28b/ SARS-S1,并在ril中得到了高效表达 ;表达的S1蛋白具有较好的抗原特异性,便于免疫动物以获得特异抗体,为SARS-CoV的实验室快速诊断打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	肖建华	湖南省南华大学病原生物学研究所	4	7	2.0	2.0
2	曾桥	湖南省南华大学病原生物学研究所	3	5	2.0	2.0
3	杨秋林	湖南省南华大学病原生物学研究所	2	4	2.0	2.0
4	万艳平	湖南省南华大学病原生物学研究所	2	2	1.0	1.0
5	吴移谋	湖南省南华大学病原生物学研究所	3	12	2.0	3.0
6	尹卫国	湖南省南华大学病原生物学研究所	1	2	1.0	1.0
7	谭立志	湖南省南华大学病原生物学研究所	1	2	1.0	1.0
8	张文波	湖南省南华大学病原生物学研究所	1	2	1.0	1.0