猪δ冠状病毒M蛋白的原核表达、纯化与鉴定

• 作者: 冯力 孙东波 石达 陈建飞 魏姗
• 来源期刊: 黑龙江八一农垦大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 猪δ冠状病毒 M蛋白 基因表达 蛋白纯化 免疫印迹
• 年，卷（期）: 2018,（5）
• 所属期刊栏目: 动物科学
• 页码范围: 41-45
• 页数: 5页
• 分类号: Q939.4
• 字数: 4088字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2090.2018.05.007

摘要

δ冠状病毒是一种可以感染哺乳动物和鸟类的新型冠状病毒,其中,猪δ冠状病毒可以引发仔猪的呕吐、腹泻、脱水,甚至死亡,给养猪业造成了巨大的损失.为了获得猪δ冠状病毒(Porcine deltacoronavirus,PDCoV)M基因重组蛋白,试验克隆了PDCoV NH毒株的M基因,并连接至pET-32a原核表达载体,构建了PDCoV M基因重组质粒(pET-32a-M),将pET-32a-M重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)后,利用1 mM浓度IPTG进行诱导表达,进一步对表达的PDCoV重组M蛋白进行纯化与鉴定.结果显示,以PDCoV NH毒株病毒RNA为模板,通过RT-PCR扩增出约654 bp的M基因,与预期大小相符;SDS-PAGE电泳结果显示,PDCoV M基因在大肠杆菌BL21(DE3)中成功获得表达,表达的重组M蛋白大小为42 kD,与预期大小相符;通过western blot进行鉴定,结果显示,纯化的重组M蛋白能与PDCoV阳性血清发生反应,具有良好的抗原性.研究成功表达了PDCoV M蛋白,为PDCoV的进一步研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈建飞	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	23	242	7.0	15.0
2	冯力	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	31	219	7.0	14.0
3	孙东波	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	49	95	5.0	8.0
4	魏姗	黑龙江八一农垦大学动物科技学院	3	2	1.0	1.0
8	石达	中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室	2	8	2.0	2.0