MERS冠状病毒核衣壳蛋白原核表达和纯化

• 作者: 付洋波 曹诚 白圆圆 胡勇 邱立红 高婷 黄成成
• 来源期刊: 军事医学
• 学科: 医学
• 关键词: 冠状病毒属 MERS-CoVN 原核表达纯化 阳离子交换层析
• 年，卷（期）: 2015,（12）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 919-922
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1
• 字数: 3797字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7644/j.issn.1674-9960.2015.12.008

摘要

目的 构建带有MERS-CoV N( MERS冠状病毒核衣壳蛋白)基因片段的pET-22b+原核表达载体,并表达和纯化核衣壳蛋白( NP). 方法 通过PCR技术扩增NP蛋白基因片段,插入到原核表达载体pET-22b+上. 使用核酸电泳、测序以及小量诱导表达确认所构建克隆的正确性,然后将重组质粒转化进大肠杆菌BL21a(DE3)中,并在大肠杆菌BL21a(DE3)中大规模诱导表达NP蛋白,使用AKTA纯化系统经强阳离子交换层析纯化出NP蛋白.结果 测序和小量诱导结果表明,扩增的NP蛋白片段序列正确,所构建的pET-22b+-NP克隆可在大肠杆菌BL21a (DE3)的包涵体和细胞质中表达;通过阳离子交换层析和浓缩后,蛋白的纯度和浓度都得到明显提高. 结论纯化出高纯度、高浓度的NP蛋白,为NP蛋白功能性研究提供重要基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	曹诚	军事医学科学院生物工程研究所	112	536	10.0	19.0
2	邱立红	军事医学科学院生物工程研究所	4	3	1.0	1.0
3	付洋波	军事医学科学院生物工程研究所	4	3	1.0	1.0
4	白圆圆	军事医学科学院生物工程研究所	3	3	1.0	1.0
5	高婷	军事医学科学院生物工程研究所	7	10	2.0	3.0
6	胡勇	军事医学科学院生物工程研究所	3	1	1.0	1.0
7	黄成成	军事医学科学院生物工程研究所	1	1	1.0	1.0