SARS冠状病毒S蛋白部分序列2的克隆与表达

• 作者: 吴少庭 屈伸 张仁利 潘辉榕 王西明 秦莉 袁仕善 雷明军 高世同 黄达娜
• 来源期刊: 中国人兽共患病杂志
• 学科: 医学
• 关键词: SARS 冠状病毒 S蛋白 克隆 表达
• 年，卷（期）: 2003,（5）
• 所属期刊栏目: SARS
• 页码范围: 17-19,136
• 页数: 4页
• 分类号: R373.1
• 字数: 2216字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1002-2694.2003.05.004

摘要

目的构建SARS冠状病毒棘突蛋白部分序列2(S2)的原核表达质粒,分析其在大肠杆菌中的表达状况.方法采用逆转录聚合酶链式反应技术从SARS冠状病毒基因组中扩增出编码S蛋白的第2170到2814位碱基的基因片段,克隆至pMD18-T载体,PCR筛选阳性克隆并测序.用限制性内切酶消化后,目的片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-2,转化大肠杆菌JM109,PCR和双酶切鉴定转化菌落.将阳性菌落经IPTG诱导,SDS-PAGE和免疫印迹分析靶蛋白的表达.结果RT-PCR扩增出S2特异片段,经测序与GenBank比对存在1处碱基突变.S2基因片段亚克隆至表达载体pGEX-4T-2构建成重组表达质粒,并在JM109中表达了S2融合蛋白.结论成功构建了SARS冠状病毒S2的重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达了S2融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张仁利		192	798	13.0	17.0
2	高世同		137	593	11.0	15.0
3	屈伸	华中科技大学同济医学院	53	375	10.0	17.0
4	黄达娜		134	499	10.0	13.0
5	吴少庭		72	281	9.0	12.0
6	秦莉	华中科技大学同济医学院	20	82	6.0	8.0
7	王西明	华中科技大学同济医学院	29	154	7.0	10.0
8	袁仕善		20	86	5.0	8.0
9	雷明军	华中科技大学同济医学院	11	23	3.0	4.0
10	潘辉榕	华中科技大学同济医学院	1	2	1.0	1.0