应用Gel Works软件定量分析PCR扩增产物

• 作者: 张琳 王滨有 许锬 陈飞
• 来源期刊: 中华中西医杂志
• 关键词: RT-PCR ε/γ血红蛋白基因 Gel Works软件 定量分析
• 年，卷（期）: 2004,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 769-771
• 页数: 3页
• 语种: 中文

摘要

目的探讨GelWorks1D软件应用于PCR扩增产物的定性与定量分析.方法提取孕妇全血mPNA,经体外逆转录后,应用ε/γ引物引导扩增胎儿特异血红蛋白基因片段,同时用不同剂量标准mRNA经逆转录及PGR扩增后,经琼脂糖凝胶电泳,以凝胶成像系统扫描成像,用Gel Works 1D软件分析凝胶图像,绘制标准曲线,对样品进行定性与定量分析.结果在7例妊娠妇女中,6例扩增出ε/γ基因片段(274bp),1例为阴性.定量标准曲线公式:Y=-2.83×10-5X2+0.06045X-2.265,R2=0.9401,6份样品中,胎儿mRNA在孕妇外周血中的浓度平均25.72ng/ml,最大值33.66ng/ml,最小值20.84ng/ml.结论Gel Works1D分析软件,可以对样品mRNA或DNA进行定性与定量分析,由于影响PCR扩增的因素较多,标准曲线的线性关系受到一定程度的限制,适当增加或减少逆转录时的模板量可克服上述缺陷.