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摘要:
目的建立一种基于生物发光技术的定量检测PCR产物的方法,并用于HBV定量PCR检测.方法首先利用ATP硫酰化酶(ATP sulfurylase)将焦磷酸(PPi)定量转化成ATP,然后利用虫荧光素酶(luciferase)系统发光检测ATP,从而确定样品中PPi含量.利用2次PCR法扩增HBV DNA目的片段,并进行回收纯化定量,以之作为阳性标准模板制作标准曲线.选择适当的循环次数扩增样品中HBV DNA,利用化学发光法检测扩增产物中PPi的量,进而确定样品中HBV DNA模板的量.结果当起始模板量为(10~5)×105拷贝,循环次数为25,发光值与起始模板浓度呈现良好的相关.检测32份样品血清,其中23例HBsAg(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)标本中HBV DNA平均含量为1.6×105拷贝/μl,9例HBsAg(+)、HBeAg(-)、HBcAb(+)标本中HBV DNA平均含量为5.6×103拷贝/μl. 结论本方法是一种操作简便、灵敏度高的定量PCR方法.
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文献信息
篇名 应用生物发光技术定量检测PCR扩增产物
来源期刊 临床输血与检验 学科 医学
关键词 生物发光 聚合酶链反应
年,卷(期) 2003,(3) 所属期刊栏目 论著
研究方向 页码范围 179-182
页数 4页 分类号 R318.03|R392.11
字数 2526字 语种 中文
DOI 10.3969/j.issn.1671-2587.2003.03.007
五维指标
作者信息
序号 姓名 单位 发文数 被引次数 H指数 G指数
1 周宜开 华中科技大学同济医学院 99 864 16.0 22.0
2 徐顺清 华中科技大学同济医学院 76 753 14.0 24.0
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研究主题发展历程
节点文献
生物发光
聚合酶链反应
研究起点
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引文网络交叉学科
相关学者/机构
期刊影响力
临床输血与检验
双月刊
1671-2587
34-1239/R
大16开
合肥市庐江路17号省立医院内
26-186
1999
chi
出版文献量(篇)
3761
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16275
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