体外培养拟胚体条件的探讨

• 作者: 唐仕波 张良 郭芬芬 黄冰
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 干细胞,胚胎 细胞培养
• 年，卷（期）: 2004,（4）
• 所属期刊栏目: 实验技术
• 页码范围: 700-702
• 页数: 3页
• 分类号: R363
• 字数: 2682字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2004.04.052

摘要

目的:探讨体外拟胚体培养中获得优质拟胚体的条件.方法:分别使用6种EB培养液:(1)添加5%胎牛血清;(2)添加10%胎牛血清;(3)添加15%胎牛血清;(4)添加20%胎牛血清;(5)添加25%胎牛血清;(6)添加20%胎牛血清和0.1 mmol/L β-巯基乙醇.将ES细胞复苏后直接作EB培养和传代后再作EB培养,观察拟胚体生长的情况,并对各培养液中的胚体形成率和活细胞比率使用SPSS统计软件包进行统计学分析.结果:20%胎牛血清浓度和β-巯基乙醇的EB培养液胚体形成率最高,与其他培养液比较,差异显著(P＜0.05),小胚体和结构松散胚体更多见于低血清浓度培养液,但各培养液中活细胞比率差异无显著.ES细胞复苏后经1代传代后作EB培养与复苏直接作EB培养,胚体形成率更高,差异显著(P＜0.05),而活细胞比率差异无显著.另外,观察中发现,充分摇动不仅能保证细胞悬浮培养,而且可以防止胚体过早分化.结论:提供足够细胞营养,使用传代后代细胞作EB培养以及悬浮培养是获得较好细胞活力拟胚体的重要保证.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭芬芬	中山大学实验动物中心	23	267	8.0	16.0
2	张良	中山大学中山眼科中心	6	38	4.0	6.0
3	唐仕波	中山大学中山眼科中心	91	528	11.0	17.0
4	黄冰	中山大学实验动物中心	43	246	9.0	13.0