丙型肝炎病毒非结构蛋白NS3上调硫氧还蛋白还原酶1基因的表达

• 作者: 刘妍 成军 王建军 纪冬 董菁 郭江
• 来源期刊: 世界华人消化杂志
• 学科: 医学
• 年，卷（期）: 2004,（7）
• 所属期刊栏目: 病毒性肝炎
• 页码范围: 1555-1558
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 4506字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-3079.2004.07.011

摘要

目的:探讨丙型肝炎病毒(HCV)非结构蛋白NS3对硫氧还蛋白还原酶1(TXNRD1)启动子转录的激活作用.方法:以HCV非结构蛋白NS3反式调节基因的基因表达谱芯片结果为基础,利用生物信息学技术确定TXNRDl的启动子区域(TXNRDlp),聚合酶链反应(PCR)扩增TXNRDlp,克隆至真核报告载体pCAT3-Basic中,构建pCAT3-TXNRD1p报告载体;以该质粒转染肝癌细胞系HepG2细胞系,用酶联免疫黏附法(ELISA)检测氯霉素乙酰转移酶(CAT)的表达活性;并与pcDNA3.1(-)-NS3共转染HepG2细胞系,用ELISA法检测CAT的表达活性.结果:成功获得TXNRDl启动子的正确克隆.CAT3-TXNRDlp和pcDNA3.1(-)-NS3瞬时转染的HepG2细胞的CAT表达活性是pCAT3-Basic空载体的9倍,pCAT3-TXNRDlp的2.0倍,进一步验证了利用基因表达谱技术研究HCV NS3蛋白反式激活作用的结果.结论:TXNRD1启动子有顺式激活下游基因的活性;HCV的NS3蛋白具有对TXNRD1的反式激活作用.