一种高温酸性α-淀粉酶基因的高效表达和表达产物分析

• 作者: 伍宁丰 姚斌 柏映国 王亚茹 罗会颖 范云六 袁铁铮
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 高温酸性α-淀粉酶 巴斯德毕赤酵母 基因表达 多组分表达产物
• 年，卷（期）: 2005,（11）
• 所属期刊栏目: 生物技术
• 页码范围: 63-68
• 页数: 6页
• 分类号: Q5
• 字数: 5305字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2005.11.013

摘要

一种高温酸性α-淀粉酶基因经密码子优化后在巴斯德毕赤酵母中得到了高效表达,表达的重组α-淀粉酶rBD5063具有α-淀粉酶的活性,表达量达到60mg/L.对rBD5063进行了纯化并对多组分的表达产物进行了研究.rBD5063作用最适pH值为5.0,在pH3.5～10.0范围内酶活性保留50%以上,最适温度在105～110℃之间,在90℃下酶活性半衰期约30min.低浓度Ca2+对激活rBD5063活性和维持稳定性是必需的,高浓度对活性会产生轻微抑制作用,Mg2+、SDS和Trition X-100都能够部分抑制rBD5063活性,Cu2+和EDTA严重抑制rBD5063活性.表达产物水解可溶性淀粉主要产物是单糖和低聚寡糖.表达产物包括分子量分别是62、56、44kD的3种活性组分,在通常情况下主要以大分子量活性多聚体的形式存在.重组α-淀粉酶rBD5063不存在N-连接的糖基化,但是存在O-连接的糖基化现象,O-连接对rBD5063的热稳定性和最适温度没有显著影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚斌	中国农业科学院饲料研究所	111	2079	24.0	42.0
2	伍宁丰	中国农业科学院生物技术研究所	56	1134	18.0	33.0
3	范云六	中国农业科学院生物技术研究所	74	2436	27.0	48.0
4	罗会颖	中国农业科学院饲料研究所	41	299	11.0	16.0
5	王亚茹	中国农业科学院饲料研究所	30	682	17.0	25.0
6	袁铁铮	中国农业科学院饲料研究所	18	500	13.0	18.0
7	柏映国	中国农业科学院饲料研究所	19	198	9.0	14.0