嗜热古菌高温酸性淀粉酶基因合成和大肠杆菌中的表达

• 作者: 柯涛 熊兰 石晴芳 马向东
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 学科: 工学
• 关键词: 高温酸性α-淀粉酶 基因合成 表达 酶学性质
• 年，卷（期）: 2008,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 30-33,39
• 页数: 5页
• 分类号: TS2
• 字数: 3982字
• 语种: 中文

摘要

BD5088是来源于1种嗜热球菌Thermococcus sp.的高温酸性α-淀粉酶的人工突变体,研究中根据BD5088基因的氨基酸序列,经密码子优化,用2步PCR法合成去信号肽后的成熟肽基因.该基因全长1311bp,由436个氨基酸组成.现将其克隆到大肠杆菌的表达载体pET30a上,在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,表达出的目的蛋白分子量约为48 ku,大小与理论值一致,经过Ni+树脂纯化,得到纯化后的重组酶BD5088.重组α-淀粉酶BD5088具有α-淀粉酶的活性,最适反应温度范围为70～85℃,最适反应pH值为5.6～6.0,在100℃下酶活性半衰期约30 min.活性不依赖于Ca2+.本研究为该基因在毕赤酵母中的表达和基因的定向进化改造打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	柯涛	南阳师范学院生命科学与技术学院	25	153	7.0	11.0
2	马向东	湖北大学生命科学学院	16	89	7.0	8.0
3	熊兰	湖北大学生命科学学院	2	29	2.0	2.0
4	石晴芳	湖北大学生命科学学院	2	9	1.0	2.0