古细菌Pyrococcus furiosus嗜热α-淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 刘吉泉 沈微 王正祥 诸葛健
• 来源期刊: 食品与发酵工业
• 学科: 生物学
• 关键词: Pyrococcus furiosus,耐热α-淀粉酶,融合表达
• 年，卷（期）: 2003,（3）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 10-14
• 页数: 5页
• 分类号: Q93|Q5
• 字数: 3027字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0253-990X.2003.03.003

摘要

用PCR方法从嗜热古细菌Pyrococcus furiosus的基因组DNA中扩增出胞外α-淀粉酶完整结构基因,插入表达载体pET28a中构建成质粒pET-amy(sig+),以质粒pET-amy(sig+)为底物扩增出不含信号序列的α-淀粉酶成熟肽基因片断,获得质粒pET-amy(sig-),将重组质粒分别转化大肠杆菌BL21(DE3).在T7启动子和lac 操纵子控制下,通过IPTG的诱导在重组大肠杆菌细胞内分别表达出含信号肽和不含信号肽的融合蛋白.其中不含信号肽的融合蛋白具有与P. furiosus产生的胞外α-淀粉酶相似的酶学性质:最适pH为5.0,最适温度约为95℃,在121℃下热处理1 h酶活仍能保持50%以上;含信号肽序列的基因的表达产物不能测到酶活.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	诸葛健	江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室	150	1920	23.0	36.0
2	沈微	江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室	98	817	14.0	24.0
3	王正祥	江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室	120	1443	20.0	31.0
4	刘吉泉	江南大学生物工程学院和教育部工业生物技术重点实验室	7	157	6.0	7.0