来源于嗜热古细菌Pyrococcus furiosus乳糖酶基因的原核表达及酶学性质分析

• 作者: 张伟 张志芳 李卓夫 杨娇艳 段文娟
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 乳糖酶 嗜热古细菌 酶学性质 原核表达
• 年，卷（期）: 2008,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 76-81
• 页数: 6页
• 分类号: Q786
• 字数: 4462字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0864.2008.02.012

摘要

以嗜热古细菌Pyrococcus furiosus的基因组DNA为模板,通过PCR克隆获得乳糖酶基因celB.将celB基因插入到表达载体pET-30a(+)上构建原核重组表达质粒pET-celB,转化大肠杆菌BL21,阳性转化子在28℃下经IFrG诱导4 h后进行SDS-PAGE电泳和酶活性测定,结果表明celB基因在大肠杆菌中获得高效表达,乳糖酶基因celB表达的乳糖酶蛋白CELB分子质量约为58kDa.CELB是耐高温酶,其酶促反应最适温度为105℃,在95℃至110℃之间热稳定性较好;pH5.0时该乳糖酶水解活力最高,在pH5.0～10.0之间,pH稳定性较好,该酶对金属离子依赖性不强.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	张伟	中国农业科学院生物技术研究所	77	419	13.0	18.0
2	杨娇艳	中国农业科学院生物技术研究所	19	174	7.0	12.0
4	张志芳	中国农业科学院生物技术研究所	76	600	14.0	20.0
5	段文娟	中国农业科学院生物技术研究所	1	10	1.0	1.0
8	李卓夫	中国农业科学院生物技术研究所	2	13	2.0	2.0