乳杆菌乳糖酶的基因异源表达及酶学性质分析

• 作者: 刘仲华 刘素纯 张伟 张宇宏 樊晓虎 章沙沙
• 来源期刊: 中国农业科技导报
• 学科: 生物学
• 关键词: 乳杆菌 乳糖酶 β-半乳糖苷酶 基因表达
• 年，卷（期）: 2011,（3）
• 所属期刊栏目: 生物技术 生命科学
• 页码范围: 53-59
• 分类号: Q786|Q814
• 字数: 5795字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-0864.2011.03.09

摘要

采用简并引物PCR和TAIL-PCR方法,从乳杆菌Lactobacilus sp.B164中克隆得到一个乳糖酶基因bg42-164.基因全长2 031 bp,编码676个氨基酸和一个终止密码子,预测分子量76 kDa,无信号肽序列.将bg42-164连接pET-30a(+)载体并转入大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后可检测到乳糖酶活力.SDS-PAGE分析乳糖酶BG42-164的蛋白分子量为76 kDa,使用组氨酸标签亲和层析方法进行蛋白纯化,并对纯化的乳糖酶BG42-l64进行了酶学性质分析.该酶最适反应温度为50℃,经50℃处理30 min后,剩余酶活力保留80%以上,pH 6.0时该酶的水解活力最高.牛奶水解试验表明,乳糖酶BG42-l64对乳糖的水解效果良好,5 mL牛奶中添加250 U酶蛋白,在50℃条件下2 h乳糖水解率为100%.该酶温度范围宽,乳糖水解效果好,为其在低乳糖奶生产中应用奠定了理论基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘仲华	湖南农业大学园林园艺学院	290	3512	31.0	42.0
2	刘素纯	湖南农业大学食品科学技术学院	115	1229	19.0	30.0
3	张伟	中国农业科学院生物技术研究所	77	419	13.0	18.0
4	张宇宏	中国农业科学院生物技术研究所	14	50	4.0	6.0
5	章沙沙	湖南农业大学食品科学技术学院	2	10	2.0	2.0
7	樊晓虎	中国农业科学院生物技术研究所	2	7	2.0	2.0