嗜热菌Pyrococcus horikoshii OT3蛋白酶基因的原核表达、纯化和性质表征

• 作者: 冯雁 白挨玺 白鹤 詹冬玲 韩葳葳
• 来源期刊: 吉林大学学报（理学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 嗜热蛋白酶 表达 纯化 性质
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 页码范围: 1065-1069
• 分类号: Q786
• 字数: 2923字
• 语种: 中文

摘要

将来源于嗜热菌Pyrococcus horikoshii OT3的蛋白酶(PH1704)基因在大肠杆菌BLP-CodonPlus中高效表达. 采用超声、 热失活和HiTrap Q Sepharose柱层析等方法对产物进行分离纯化. 通过SDS-PAGE, Native-PAGE和Western-blot对表达产物进行鉴定, 发现该重组酶以十二聚体为主的寡聚体形式存在, 并具有SDS抗性. 蛋白酶活力染色表明, 其六聚体以上有活力. 以azo-gelation为底物, 对其酶学性质进行初步研究表明, 其最适温度为85 ℃, 最适pH=8.0, 并且具有良好的热稳定性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	詹冬玲	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	40	122	6.0	9.0
3	冯雁	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	28	349	9.0	18.0
4	白挨玺	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	2	8	2.0	2.0
7	白鹤	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	2	6	1.0	2.0
8	韩葳葳	吉林大学分子酶学工程教育部重点实验室	16	26	4.0	4.0