密码子优化的HPV16 L2E7基因在大肠杆菌中高效表达

• 作者: 任皎 张卉 田厚文 赵莉 阮力 高见
• 来源期刊: 中国医学科学院学报
• 关键词: 人乳头瘤病毒 密码子优化 疫苗 大肠杆菌
• 年，卷（期）: 2007,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 579-583
• 页数: 5页
• 分类号: R373|Q784
• 语种: 中文

摘要

目的 提高HPV16 L2E7融合基因在大肠杆菌中的表达水平,为中试研究提供高表达量的疫苗候选株.方法 根据大肠杆菌偏爱密码子,利用Synthetic Gene Designer软件对L2E7全基因进行密码子优化,将分段合成的基因分部插入到pET9a中,经酶切和测序鉴定无误后转化BL21(DE3+)中,用异丙基-β-D硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达.表达的融合蛋白进行SDS-PAGE胶和Western blot鉴定.同时还进行梯度实验分别对诱导的温度、时间和IPTG诱导时菌体浓度进行优化,并对蛋白的纯化方案进行摸索.结果 优化后的pET9aSL2E7AB在大肠杆菌中得到高效表达,诱导条件优化后的目的蛋白占全菌60%左右.结论 成功得到了具有较高表达水平的疫苗候选株.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	阮力	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所应急技术中心	65	243	10.0	13.0
2	赵莉	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所应急技术中心	15	40	4.0	5.0
3	任皎	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所应急技术中心	15	66	4.0	7.0
4	高见	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所应急技术中心	3	15	2.0	3.0
5	田厚文	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所应急技术中心	24	79	5.0	8.0
6	张卉	中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所应急技术中心	3	25	2.0	3.0