马槟榔甜蛋白基因(MabinlinⅡ)的密码子优化及其在大肠杆菌中的表达

• 作者: 何明娟 刘宁 吴文惠 潘迎捷 蒋霞云 邹曙明
• 来源期刊: 食品工业科技
• 学科: 工学
• 关键词: 甜蛋白 MabinlinⅡ 密码子优化 诱导表达
• 年，卷（期）: 2019,（18）
• 所属期刊栏目: 生物工程
• 页码范围: 78-84
• 页数: 7页
• 分类号: TS201.3
• 字数: 6724字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13386/j.issn1002-0306.2019.18.013

摘要

本研究根据大肠杆菌密码子的偏好性,对马槟榔甜蛋白基因MabinlinⅡ(A链+B链)的密码子进行优化,并将优化后的马槟榔甜蛋白基因命名为MabinlinⅡ(AB) Plus.将MabinlinⅡ(AB) Plus基因与大肠杆菌表达载体pET-28a(+)片段连接,构建重组表达载体pET-28a(+)-MabinlinⅡ(AB) Plus,进而转化到大肠杆菌宿主表达菌株BL21(DE3),IPTG诱导蛋白表达.结果 表明,密码子优化后的基因MabinlinⅡ(AB) Plus在大肠杆菌中最佳表达条件为:最适IPTG浓度1.4 mmol/L,最佳诱导剂温度为37℃,最适菌株起始生长量0D600为0.7,最佳诱导时间8h.在最佳诱导表达条件下,目的蛋白表达量占菌体总蛋白约33.0％,与优化前约有提高7％.目的蛋白的上清液经过亲和纯化,在19 kDa处有单一的目的条带.经过感官评定,目的蛋白的甜度约为2％标准蔗糖溶液的400倍.这为研发以马槟榔甜蛋白为基础的新型甜味剂提供了科学的理论依据.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	潘迎捷	上海海洋大学食品学院	111	1207	20.0	28.0
2	刘宁	上海海洋大学食品学院	6	5	1.0	2.0
4	蒋霞云	上海海洋大学食品学院	7	114	4.0	7.0
8	邹曙明	上海海洋大学食品学院	34	235	8.0	14.0
12	何明娟	上海海洋大学食品学院	2	3	1.0	1.0