密码子优化的牛精蛋白基因在大肠杆菌中的表达

• 作者: 张雅丽 杨国庆 郭英 陈永福
• 来源期刊: 高技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 密码子优化 牛精蛋白 大肠杆菌 表达
• 年，卷（期）: 2002,（4）
• 所属期刊栏目: 生物与现代农业技术
• 页码范围: 42-46
• 页数: 5页
• 分类号: Q81
• 字数: 5098字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1002-0470.2002.04.010

摘要

以PCR的方法得到牛精蛋白基因组基因,去其内含子,得到牛精蛋白cDNA,克隆入原核表达载体pGEX-2T中,组装成表达载体pGEX-2T-PE.利用大肠杆菌偏好的编码精氨酸的密码子CGT将野生型牛精蛋白基因中编码精氨酸的稀有密码子( AGA或AGG)替换掉,通过基因合成得到密码子优化的牛精蛋白基因,将其克隆入原核表达载体pGEX-2T,组装成表达载体pGEX-2T-PS.将这两个表达载体分别转化入大肠杆菌表达菌株BL21中,经IPTG诱导,同样条件下,野生型牛精蛋白基因无法得到表达,密码子优化的牛精蛋白基因能够得到良好的表达,表达产物约占细菌总蛋白的18%.将表达蛋白纯化,进行DNA-蛋白结合实验,发现其能与DNA发生非特异性的结合.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈永福	中国农业大学生物技术国家重点实验室	147	1482	21.0	31.0
2	杨国庆	中国农业大学生物技术国家重点实验室	9	133	5.0	9.0
3	郭英	中国农业大学生物技术国家重点实验室	13	75	5.0	8.0
4	张雅丽	中国农业大学生物技术国家重点实验室	28	136	7.0	10.0