旋毛虫新生幼虫WN1抗原基因的克隆及表达

• 作者: P.Boireau 付宝权 刘明远 卢强 吴秀萍 孙树民 郭桓 陈启军 高长玲
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 农学
• 关键词: 旋毛虫 新生幼虫 基因克隆 表达
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 人兽共患病
• 页码范围: 276-278
• 页数: 3页
• 分类号: S852.7|Q78
• 字数: 2720字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-4545.2005.03.016

摘要

应用旋毛虫人工感染猪血清对旋毛虫新生幼虫cDNA文库进行免疫筛选,对阳性克隆WN1序列进行生物信息学分析.结果表明,WN1 cDNA全长为474 bp,含有1个354 bp的完整的开放阅读框架(ORF),编码的多肽由117个氨基酸残基组成,其相对分子质量理论推导值为13 200,等电点为4.25,N-末端的信号肽表明其可能为分泌性蛋白.GenBank数据库检索结果显示,此序列为一个新基因的全长cDNA.经PCR扩增WN1基因,将其克隆到原核表达载体pET28a,重组质粒经鉴定后,转化大肠杆菌BL21 star(DE3)并诱导表达出相对分子质量为15 000的重组蛋白,与理论设计完全相符.