产1,3-丙二醇新型重组大肠杆菌的构建

• 作者: 唐雪明 张晓梅 方慧英 沈微 诸葛健 诸葛斌 饶志明
• 来源期刊: 生物工程学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶 重组大肠杆菌 1,3-丙二醇
• 年，卷（期）: 2005,（5）
• 所属期刊栏目: 基因工程
• 页码范围: 743-747
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 5007字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-3061.2005.05.012

摘要

利用PCR技术从大肠杆菌(Escherichia coli)中扩增出1.16kb的编码1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的基因yqhD,将其连接到表达载体pEtac,得到重组载体pEtac-yqhD,重组载体在大肠杆菌JM109中得到高效表达.SDS-PAGE分析显示融合表达产物的分子量均为43 kD,同核酸序列测定所推导的值相符.对含有yqhD的基因工程菌进行表达研究表明:37℃,以1.0mmol/L IPTG诱导4 h,1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶的酶活力达到120 u/mg蛋白,而对照菌株的酶活力为0.5 u/mg蛋白.再将含甘油脱水酶基因dbaB和含1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶基因yqhD的重组质粒共转化大肠杆菌JM109得到重组大肠杆菌JM109(pUCtac-dhaB,pEtac-yqhD),该菌株在好氧条件下,以1.0 mmol/L IPTG诱导可将50g/L甘油转化为38.0 g/L1,3-丙二醇.首次发现1,3-丙二醇氧化还原酶同工酶在好氧条件下表现出较高的活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	诸葛斌	江南大学生物工程学院工业微生物研究中心	74	300	9.0	13.0
2	方慧英	江南大学生物工程学院工业微生物研究中心	95	670	12.0	22.0
3	诸葛健	江南大学生物工程学院工业微生物研究中心	150	1920	23.0	36.0
4	沈微	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	98	817	14.0	24.0
5	饶志明	江南大学教育部工业生物技术重点实验室	107	599	12.0	20.0
6	唐雪明	江南大学生物工程学院工业微生物研究中心	21	261	10.0	15.0
7	张晓梅	江南大学生物工程学院工业微生物研究中心	53	428	11.0	18.0