禽流感病毒血凝素基因突变体的构建及其在293T细胞中的表达

• 作者: 刘华雷 周斌 曹瑞兵 陈溥言 魏建超
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 血凝素基因 裂解位点 定点突变 间接免疫荧光
• 年，卷（期）: 2005,（4）
• 所属期刊栏目: 研究简报
• 页码范围: 614-616
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 3293字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2005.04.028

摘要

采用PCR定点突变技术,通过重叠延伸法3次PCR扩增,扩增片段上含有所需要的突变位点,最后将扩增片段克隆入pcDNA3载体中,DNA测序表明在预期位点已经发生突变,HA基因裂解位点的氨基酸组成为RKKR↓GLF突变为RSSR↓GLF,通过磷酸钙共沉淀方法将HA基因突变体的重组质粒瞬时转染293T细胞,采用间接免疫荧光鉴定其表达情况.IFA证实突变后的HA在细胞膜上获得了有效表达.HA基因突变体的成功构建,为进一步研究该突变位点导致AIV进入细胞的发病机制和HA蛋白的结构和功能的关系奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈溥言	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	269	2875	28.0	40.0
2	周斌	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	62	792	17.0	26.0
3	曹瑞兵	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	71	897	19.0	28.0
4	魏建超	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	11	90	6.0	9.0
5	刘华雷	南京农业大学农业部动物疫病诊断与免疫重点开放实验室	9	160	6.0	9.0