CD80/IgG融合基因真核表达载体的构建及在CHO细胞中的表达

• 作者: 何伟 张敏 邹萍
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 融合基因蛋白质类,CD80/IgG 免疫逃逸 免疫疗法 中国仓鼠卵巢细胞
• 年，卷（期）: 2005,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 1182-1186
• 页数: 5页
• 分类号: R733
• 字数: 3797字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:1000-4718.2005.06.032

摘要

目的:构建CD80/IgG真核表达载体,使其在中国仓鼠卵巢细胞(CHO)中呈分泌型表达,为白血病免疫基因治疗的研究奠定基础. 方法: 采用多聚酶链反应(PCR)技术分别从小鼠脾细胞和含小鼠CD80全长互补DNA(cDNA) 的质粒pcDNA/B7中扩增出免疫球蛋白IgG1的Fc段和CD80胞外区,以定向克隆的方法将其串联至真核表达载体pcDNA3.0中,获得重组表达载体pcDNA/CD80-IgG;采用脂质体转染技术转染CHO细胞,G418筛选得到稳定表达细胞株;免疫印迹、斑点ELISA及流式细胞术鉴定融合蛋白的表达,并初步检测其活性. 结果: DNA测序证明两段基因正确克隆至pcDNA3.0的多克隆位点,CHO细胞的培养上清中可检测到融合蛋白的表达,其分子量大小和预期的基本一致,该融合蛋白可提高白血病细胞表面CD80的表达. 结论: 成功构建pcDNA/CD80-IgG真核表达载体,并在CHO细胞中分泌性表达有活性的CD80-IgG融合蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	邹萍	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	258	977	13.0	18.0
2	张敏	华中科技大学同济医学院附属协和医院血液病研究所	197	1492	20.0	32.0
3	何伟	广州医学院第一附属医院肿瘤血液中心	6	6	2.0	2.0