GADD45β基因表达诱导对不同p53状态的肝癌细胞作用

• 作者: Bingsen Zhou Dana Darwish Frank Luh Peiguo G. Chu YEN Yun 李宏为 杨卫平 沈柏用 邓侠兴 邱伟华 陈皓
• 来源期刊: 外科理论与实践
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 基因,GADD45β 基因,p53 细胞凋亡
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 155-160,164
• 页数: 7页
• 分类号: R735.7
• 字数: 6578字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1007-9610.2005.02.017

摘要

目的:体外合成GADD45β基因全序列表达质粒后,研究GADD45β基因表达诱导对呈不同p53状态的肝癌细胞的作用及可能机制.方法:采用RT-PCR法获得GADD45β基因全序列,插入pDrive穿梭克隆载体和pIRES2-EGFP荧光表达载体后大量扩增获得DNA,结合p53全基因表达质粒pp53-EGFP转染HepG2、Hep3B细胞后,以[3H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法(3H-Tdr)和细胞克隆形成法分析DNA合成变化及细胞生长能力;以双抗体夹心ELISA法测定TGF-β1表达变化.结果:成功合成GADD45β基因全序列和表达质粒,通过流式细胞仪收集转染阳性的荧光表达细胞能显著提高转染效率;转染GADD45β后,具有野生型p53基因的HepG2细胞的细胞克隆形成能力和DNA合成能力明显受到抑制,细胞凋亡明显增加,TGF-β1的表达亦明显受抑.与之相反,缺失p53基因的Hep3B需要同时共转染p53基因后,方出现抑制效应.结论:GADD45β基因能够有效抑制肝癌细胞的生长,其功能需要完整p53基因的辅助和(或)调控.GADD45表达和(或)功能异常,导致p53介导的DNA损伤修复途径异常或阻断,是肝脏细胞恶性转化及形成肿瘤的可能机制.