苜蓿中华根瘤菌042BM noeA基因的克隆、敲除与功能的初步分析

• 作者: 姜巨全 李小红 杜秉海 杨苏声 王磊
• 来源期刊: 微生物学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 苜蓿中华根瘤菌 结瘤基因,基因敲除,结瘤作用
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 遗传学和分子生物学
• 页码范围: 195-200
• 页数: 6页
• 分类号: Q93|Q78
• 字数: 3410字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3321/j.issn:0001-6209.2005.02.008

摘要

通过PCR扩增获得了042BM的noeA基因.该基因与苜蓿中华根瘤菌(Sinorhizobium meliloti)1021noeA的同源性为99%,而其NoeA与1021NoeA的相似性为97%.还发现其NoeA与中慢生根瘤菌(Mesorhizobium sp.)BNC1可能的SAM-依赖性的甲基转移酶相似性为32%,而其303～362氨基酸区域与大肠杆菌(Escherichia coli)的核糖体50S亚基的L11蛋白甲基转移酶(PrmA)的160～220氨基酸区域的相似性达到41%.通过插入卡那盒,敲除noeA,获得突变株042BMA-Km.与苜蓿中华根瘤菌042BM相比,敲除noeA的突变株在普通紫花、保定、宁夏、百发和傲汉苜蓿品种上的结瘤数、根瘤鲜重和植株地上部分的干重都有不同程度的增加,而在秘鲁苜蓿品种上的结瘤数和植株地上部分的干重明显下降,在皇后和美国杂花苜蓿品种上则没有明显的变化.