两株Wa株人源轮状病毒NSP4蛋白的表达及其致ICR小鼠腹泻的毒力比较

• 作者: 侯宗柳 刘建生 孟明耀 庞伟 徐冬蕾 戚勤 王萍 黄永坤
• 来源期刊: 医学分子生物学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 轮状病毒 NSP4蛋白 腹泻
• 年，卷（期）: 2005,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 94-97
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3977字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3870/j.issn.1672-8009.2005.02.005

摘要

目的研究两株Wa株人源轮状病毒NSP4蛋白139位氨基酸位点的变异对毒力的影响.方法从2002 ～ 2004年昆明地区婴幼儿轮状病毒感染者大便样品中,通过RT-PCR,PCR扩增了22株轮状病毒株的NSP4 全长基因、cDNA序列,并对cDNA序列测序,发现这些病毒株的NSP4氨基酸序列高度保守,仅在79位、139位氨基酸位点存在差异.选取139位氨基酸不同(V/I)的两株病毒株,在E. coli BL21中,用pGEX5X-1载体融合表达了两株病毒的86 ～ 175位氨基酸(GST-NSP486-175);并酶切融合头得到两种NSP486-175 蛋白,在ICR乳鼠中比较这4种不同蛋白致小鼠腹泻的差异.结果发现GST-NSP486-175蛋白毒性比NSP486-175蛋白强,而139位氨基酸不同(V/I)的两株病毒株的NSP486-175蛋白毒性没有明显的差异.结论 139位氨基酸位点的变异并不影响NSP4蛋白的毒力改变.