重组E2蛋白-乳胶凝集试验检测猪瘟病毒血清抗体

• 作者: 周斌 张晓勇 曹瑞兵 李鹏 苏小运 郑其升 陈溥言
• 来源期刊: 农业生物技术学报
• 学科: 农学
• 关键词: 猪瘟病毒 HA 表位 乳胶凝集试验
• 年，卷（期）: 2005,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 331-334
• 页数: 4页
• 分类号: S8
• 字数: 3762字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-7968.2005.03.012

摘要

人工合成4条两两互补的DNA序列,经磷酸化和退火后与经BglⅡ酶切的pET-E2载体连接,得到pET-E2HA重组质粒.该质粒除表达E2蛋白A/D抗原区外,还表达3个串联的人流感病毒(Human influeoza virus)血凝素表位.重组质粒转化到大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3),用IPTG诱导表达.利用纯化后的表达产物与流感病毒血凝素单抗及乳胶建立了诊断猪瘟抗体水平的乳胶凝集试验.利用盐酸胍溶解包涵体并过His·Bind柱,获得纯化的重组蛋白.研究结果表明,乳胶凝集方法具有操作简便、快速、敏感性高、特异性强、价格低廉且可用于现场检测等优点,是一种适合基层兽医单位用于猪瘟病毒(Classical swinefever virus,CSFV)血清抗体检测的新方法.